作业帮细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数?标准菌株提取的细菌DNA浓度后,如何换算成DNA拷贝数,以制作荧光定量PCR的标准曲线!?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/16 18:46:09
细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数?标准菌株提取的细菌DNA浓度后,如何换算成DNA拷贝数,以制作荧光定量PCR的标准曲线!?
细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数?
标准菌株提取的细菌DNA浓度后,如何换算成DNA拷贝数,以制作荧光定量PCR的标准曲线!?
细菌DNA浓度如何换算为DNA拷贝数?标准菌株提取的细菌DNA浓度后,如何换算成DNA拷贝数,以制作荧光定量PCR的标准曲线!?
需要知道DNA浓度、DNA片段长度.即可换算成拷贝数
1A260 吸光度值＝ds DNA 50 ug/ml=ss DNA 33 ug/ml=ss RNA 40 ug/ml
核酸浓度＝(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]= ng/ul
MW 代表 克/摩尔,单位dolton：1dolton即表示 1g/mol
1 摩尔= 6.02 x 10(23)次摩尔分子(拷贝数)
平均分子量（MW）:
dsDNA=(碱基数) x (660 道尔顿/碱基)
ssDNA=(碱基数) x (330 道尔顿/碱基)
ssRNA=(碱基数) x (340 道尔顿/碱基)
得到拷贝数计算公式:
(6.02 x 10(23)次拷贝数/摩尔) x (浓度) / (MW g/mol) = copies/ml.
即：
(6.02 x 10(23)) x (g/ml) / (DNA length x 660) = copies/ml.
或
(6.02 x 10(23)) x (ng/ul x 10(-9) ) / (DNA length x 660) = copies/ul.
总之,如果DNA/RNA的量是ng/ul,那么拷贝数（copies/ul）=[（ng数×10的-9次方）×（6.02×10的23次方）]÷（碱基数×345）
例：
3000 碱基质粒,浓度100 ng/ul ,MW= 3000 bp x 660 dalton/bp =1.98 x 10(6) daltons,即1 mol =1.98 x 10(6) g.
[ 100ng x 10(-9) ] g / 1.98 x 10(6) ＝ 摩尔数 copy数＝ 摩尔数 x 6.02 x 10(23)＝ 3x 10(10) copies/ul.