请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段.

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 14:08:11
请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段.
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请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段.
请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?
还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段.

请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段.
一定要用高保真酶的,有两点原因：第一,就是第一条回答,高保真能够保障基因扩增引起的不必要突变.如果你的扩增片段全长只有79bp那就无所谓了,但要参照第二条）；第二,就是高保真酶不会在扩增的末尾（即3‘端）加A,引来后续操作不必要的麻烦.

一定要用高保真酶，只要做突变，目标就是只有设计位点被改变，而其他位点不能有变化。如果不用高保真酶，一旦发生错误掺入，后面的实验结果就没有意义了。而且即使用了高保真酶，扩增完成后，也任然需要克隆，测序后，才能确认片段是否满足要求。...

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一定要用高保真酶，只要做突变，目标就是只有设计位点被改变，而其他位点不能有变化。如果不用高保真酶，一旦发生错误掺入，后面的实验结果就没有意义了。而且即使用了高保真酶，扩增完成后，也任然需要克隆，测序后，才能确认片段是否满足要求。

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呵呵，一定要用高保真酶的，有两点原因：第一，就是第一条回答，高保真能够保障基因扩增引起的不必要突变。（呵呵，如果你的扩增片段全长只有79bp那就无所谓了，但要参照第二条）；第二，就是高保真酶不会在扩增的末尾（即3‘端）加A，引来后续操作不必要的麻烦。

~.~嗯嗯，谢谢你的答复，其实我想说，我的全长片段就是79bp（可能上面没有描述清楚）.其中我就做了一个单突变。也就是一个氨基酸...

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呵呵，一定要用高保真酶的，有两点原因：第一，就是第一条回答，高保真能够保障基因扩增引起的不必要突变。（呵呵，如果你的扩增片段全长只有79bp那就无所谓了，但要参照第二条）；第二，就是高保真酶不会在扩增的末尾（即3‘端）加A，引来后续操作不必要的麻烦。

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请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段. 什么叫overlap PCR 什么是overlap extension pcr 什么原因会导致overlap PCR拼不出? 用PCR合成DNA属于克隆吗 PCR的合成原理 PCR产物用什么方法纯化我要做RFLP,PCR后要做酶切,请问用什么方法纯化PCR产物比较好呢? 那请问RACE后,引物合成回来,进行PCR时,（加UPM的体系）,PCR体系是多少啊? PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP：引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的Taq酶.PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp.用文献报道的Msp I文字1μL,PCR产物 哪里可以合成pt-pcr探针请问国内哪家公司可以合成RT-PCR探针,Taqman或者分子信标等, 对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求? 我只做过RNA提取,cDNA合成,荧光定量pcr,能从事什么工作? 合成一对引物能做几个相同的样本?我需要做60个样本的PCR,用的引物都是相同的,找生物公司合成引物要花多少钱啊? 谁可以简单罗列下做OVERLAP PCR的要点吗?最好图解原理 以及引物设计时候注意事项 PCR合成引物,OD指什么 请问RACE-PCR是什么意思? 定量PCR用rRNA做内标请问定量PCR为什么要用rRNA做内标? ABI7900 能做梯度PCR 我想用ABI7900做梯度PCR,请问怎么操作,