PCR的完整操作步骤是什么?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 21:58:35
PCR的完整操作步骤是什么?
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PCR的完整操作步骤是什么?
PCR的完整操作步骤是什么?

PCR的完整操作步骤是什么?
首先在PCR仪中设定程序:一般是94度变性5min,之后“94度变性、退火(不同引物温度不同)、72度”延伸共30-35个循环,再72度延伸10min,最后hold16度即可.反应体系一般有20微升或50微升,由上下游引物、buffer、dNTP、模板、Taq酶和水等组成,配好后放入PCR仪中按设定程序进行即可.

应该保存在4℃

1、配反应体系:引物、模板、buffer,dNTPs,酶,Mg2+,(如果是荧光定量PCR,则还有染料或探针)
2、设置热循环参数,94、55、72等
3、上机实验,如果是荧光定量PCR则实时可以观察实验过程
4、如果是常规PCR,则后面还有电泳,杂交,测序等