ELISA实验操作中注意事项有哪些啊?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 05:43:21
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ELISA实验操作中注意事项有哪些啊?
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1.储存.
收到试剂盒后应尽快放入冷藏室内保存,保存温度为4℃-8℃.
2.回温.
试剂盒在使用前应于室温(22-27℃)下充分回温,回温时间为40-60分钟.回温过程中勿将酶标板的包装袋开封,回温结束后再将其从包装袋中取出使用.
3.样品稀释.
样品稀释应严格按照说明书要求的稀释倍数进行稀释.如稀释倍数过大,可采用多步法进行样品稀释.例如:试剂盒要求样品需进行500倍稀释,可吸取5μl样品加入245μl样品稀释液中,充分混匀后,再吸取10μl混合液加入90μl样品稀释液中即可.
4.加样.
稀释好的样品在加入酶标板进行孵育的过程中,尽可能缩短第一次加样和最后一次加样的时间间隔,样品加好后马上开始计时.
5.洗板.
样品孵育时间结束后,马上甩去孔内液体.如多块酶标板需同时洗涤,可先将板内液体甩去,倒扣于吸水纸上,再依次进行洗涤.使用洗板机洗涤时,建议洗涤次数增加一次.未用完的洗涤液可在4℃-8℃下密封保存1月.
6.显色.
底物药片可在显色前3-5分钟加入底物缓冲液中,混合直到完全溶解.本试剂最好是现用现配,未用完的底物溶液可在4℃-8℃下避光保存1周.
7.终止及读数.
提前打开酶标仪,加入终止液后立即读数.
8.同批号试剂盒中的试剂,除酶标二抗及阳性对照外,其余均可通用.
9.移液器的正确使用、保存、清洁、校对.
10.实验室管理
桌面保持整洁,插枪头戴手套等.
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