请问PCR引物怎么设计

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 10:05:32
请问PCR引物怎么设计
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普通PCR规则：
1、18-25 bp；2、Tm值在45-60；3、2个引物之间没有超过5bp的互补序列；4、CG%在40-60%；5、避免连续出现3个以上的CCC或GGG；6、不要迷信百度.

一般都用软件设计。目前比较好，且免费的：
http://www.bioinformatics.nl/cgi-bin/primer3plus/primer3plus.cgi
输入你的DNA序列，用下方标明的符号注释你的序列后就可以设计引物了

这个主要是看你合成引物的目的是什么，如果只是普通的PCR，就不需要HPLC纯化，选择OPC或PAGE的方法就可以了。一般在用于多重PCR或定量PCR、点突变或克隆、反义DNA修饰或标记DNA以及化学或物理应用才需要用到HPLC纯化。

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