以革兰氏阳性菌基因组为模板,目的片段500bp左右,体系为,模板1μL,dNTP 2μL,引物1μL,Taq 0.2μL退火温度是50°C,但是PCR后没有目的条带,只要二聚体,引物已经设计两次了,请问可能是什么问题?

以革兰氏阳性菌基因组为模板,目的片段500bp左右,体系为,模板1μL,dNTP 2μL,引物1μL,Taq 0.2μL退火温度是50°C,但是PCR后没有目的条带,只要二聚体,引物已经设计两次了,请问可能是什么问题? 菌株菌粉可以直接做菌落PCR么?购买的标准菌株粉末可以直接至于50ulTE溶液,95度热处理5分钟,作为PCR模板么?为什么我扩增不出来目的片段呢?是因为革兰氏阳性菌的细胞壁太厚么?如果是我应该 PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.（引物换了很多对儿,卡的 PEDV中的RdRp以基因组RNA为模板转录产生负链RNA,然后再以负链RNA为模板合成不同长度的亚基因组mRNA（sgmRNA）和基因组RNA.请问这里的亚基因组mRNA是什么? 基因组测序 都怎么提基因组,用什么试剂盒啊我提取的是链霉菌，革兰氏阳性菌 关于基因组克隆的问题问下哦,以DNA为模板,设计两端引物（引物包含起始密码子和终止密码子）.扩出来的片段,与以CDNA模板扩出来的一样.是不是就可以说这个基因没有内含子啊?我说的是以DNA 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 革兰氏阳性细菌基因组DNA提取试剂盒 北京庄盟的 可以提取那些菌?谢 基因组为何PCR 不出条带,测出的浓度为4480ng/ul 基因组PCR和片段质粒PCR一样吗 有什么区别 比如引物量和模板量、温度等等 转基因得到了转化苗,做PCR的时候,如果质粒P出了阳性 对照的基因组没有条带 是不是就能确定没转进去基因第一次做的时候,质粒是阳性的,样品有2个在目的片段那也出现了条带,但很暗,后来再 为什么用RNA为模板,以基因组设计引物可以PCR出产物用DNaseI处理后,还是可以PCR出产物,请问还有其他原因吗? 流感病毒进入人体细胞后,以RNA为模板,在逆转录酶的作用下台成DNA并整合于人的基因组中 这话对吗?谢谢 MRNA是以基因片段为模板合成的,那TRNA是以基因片段为模板合成的还是非基因片段为模板合成的呢? 什么是革兰氏阳性菌 北京庄盟公司的革兰氏阳性细菌基因组提取试剂盒步骤如何? PCR引物设计问题如果我设计的引物,扩增出来的目的片段长度为200BP,但是石蜡包埋组织提取出来的DNA模板大多数在100-120BP长度,那该如何.模板比理论上要扩出来的目的片段长度还短,怎么解决 基因克隆实验克隆实验问题 1、以cDNA为模板做PCR反应,得到的产物和预期的长度一样.2、再用pMD-19载体连接目的片段,之后液体LB（含氨苄）200转震荡培养1-2小时,取300微升倒在LB平板培养24小时 革兰氏阳性菌PCR革兰氏阳性菌如何做菌落PCR?煮20 min后,还是不能P出目的条带.