作业帮怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/16 00:47:59
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怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
转录因子包含DNA binding domain (BD)和activation domain (AD),而且不同转录因子的BD和AD是可以互换而不影响转录激活的.你想证明是activation domain,就融合到一个已知转录因子的BD里,常用的就比如Gal4,LexA的BD,然后去检测reporter gene的转录情况.如果有转录发生,则转录因子完整,如果没有检测到转录,则转录因子不完整,缺AD,那么你想证明的蛋白就不是AD.
一般编码一个蛋白的基因融合到明确的转录调控因子的DNA－结合结构域(如GAL4-bd， LexA-bd)； 另一个基因融合到转录激活结构域(如GAL4-ad， VP16)。
怎样设计实验证明VP16蛋白是转录因子的激活结构域?
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