如何提取小鼠骨髓细胞?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/05 16:00:38
如何提取小鼠骨髓细胞?
xU[OG+yAj_HA(QC^ZUH!J}tm//;cp!6kfg =c yj3}3Dakci視9sUqlsG>~f>%S3=ͣylZ9ңjʀo 1%*,{KǕfeT:P|ɜ^Za4xθAyGXe$-#dWg K| 9";,qm1r(JAAx`_;$4wJWН- [sF0W{NbxXĕ/L&2YF Ev )G(B+UiH0`<+uI[93 dBV<9yx @Q9{w8\AAbm'Y_ d:օq~' 炫֪F!ȐBi<8 Ɉ% Bd.XJ= Ibsϲu_p1V*ԈRh=<~|:Mpt~hNmCK]Ҡ>3^hR'idftn; P'TO7GI'}%T*X L#%&=Oa (Lnp$r|ij}iRYWIIoE@ˉ:Ų?I(!RR"](2e"bIfTT0N^g3$y .@4wz{XKvG|yǬfmOp}&[,f. Ud Ee)? 3`~g)Q`VfCYp~G?B, <Ġg?nk:3Q&N9A7`mSb2a4_XU&= KzK~yiwsW~\ȄT(Qu˫+HZyo >i֑坝"/t(1\`]SUnHQ5ˊ#\ >vkmsiEYtN'o/#kP.

如何提取小鼠骨髓细胞?
如何提取小鼠骨髓细胞?

如何提取小鼠骨髓细胞?
1、颈椎脱臼法处死小鼠(C57型小鼠),放在75%酒精中侵泡3-5分钟后,拎出后将小鼠铺于超净台上一个消毒托盘上.
2、无菌提取小鼠的四肢骨,用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤,用眼科剪小心剪开皮肤,并分离两下肢的皮肤,往下在脚踝处剪断,往上在髋关节处剪断,这样可以游离出小鼠的两条下肢.
3、小心剥离肌肉,分别剪下Femurs（大腿骨）and Tibias（胫骨）,剪去两端软骨,露出红色的骨髓腔.注意尽可能少的剪走骨髓腔.用纱布将骨头上的肌肉用纱布擦拭干净.
4、拿一支1ml的无菌注射器,每支吸取1mlHBSS液,并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯.轻轻插入骨髓腔,冲洗骨髓腔以获得骨髓,一般用2-3ml培养基冲洗两次,可冲出绝大部分细胞.
5、过滤：用2OO目的滤网过滤,将滤网的中央插入到离心管里面25px处,然后用注射器吸取骨髓液,慢慢将骨髓液经滤网注入离心管中,去除残渣.
6、离心：将离心管放置离心机中离心10分钟（1350r/min）
7、去上清,加入1ml红细胞裂解液ACK,静置3分钟,再加9ml HBSS溶液,进行离心10分钟,弃上清.
8、用HBSS液洗涤骨髓细胞2次,室温,1350r/min离心10分钟.计数活细胞,用培养基调整细胞浓度至1X106个细胞/ml.
9、在试管中加入RPMI-1640培养基,然后再加入20ng/ml的细胞因子GM-CSF、5%FBS、0.1%的2-巯基乙醇,
10、吸取培养基加入到沉淀中混匀,24孔板铺板培养,每个孔1ml.

钢针提取。

如何提取小鼠骨髓细胞? 如何从小鼠脾脏中提取淋巴细胞 骨髓细胞 如何制作 提取出的小鼠线粒体如何保存,能保存多久我要测定小鼠线粒体的一些指标,必须现做实验现提取吗?多谢了 如何提取小鼠脂肪组织的蛋白和做western blot 如何提取小鼠的脾细胞及胸腺细胞?需要哪些仪器和试剂? 在制备小鼠骨髓细胞染色体时为什么要进行预固定? 制备小鼠骨髓细胞染色体标本时,为什么要进行预固定? 小鼠腹水中能不能提取单克隆抗体? 小鼠单克隆抗体如何培养 效应B细胞与小鼠骨髓细胞制备细胞采用的技术是什么?该技术常用什么方法? C57BL/6小鼠如何标记 跪求小鼠胰腺的提取及其保存方法. 如何利用小鼠胚胎干细胞制作纯合转基因小鼠 如何鉴别昆明种小鼠与BALB/c小鼠? 在过氧化物酶的显示 实验中 为什么要用小鼠的后肢骨髓细胞来观察 用其他部位的细胞会有什么效果 转基因小鼠的基因型如何鉴定 如何选择转基因小鼠的报告基因