RFLP-PCR的定义是什么
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/05 17:19:10
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RFLP-PCR的定义是什么
RFLP-PCR的定义是什么
RFLP-PCR的定义是什么
聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法是采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的DNA片段,然后将待检测的DNA片段用限制性内切酶酶切,限制性内切酶识别并切割特异的序列,然后将酶切后的产物进行电泳,再由限制酶图谱(restriction map)分析此段序列的特异切位点,藉由片段的多样性来比对不同来源基因序列的差异性.
简而言之,就是先PCR扩增相应目的片断,而后进行限制性内切酶切反应,电泳后观察比较限制性图谱来分析序列之间的差异.
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PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP:引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的Taq酶.PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp.用文献报道的Msp I文字1μL,PCR产物
PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.